10. ОБРОБКА ТА ОФОРМЛЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ВИМІРЮВАНЬ
10.1. За результат вимірювання приймають середнє значення
(х , ) двох паралельних вимірювань, яке розраховується за
ср
формулою: х = (х + х )/2,
ср 1 2
де х , х - значення, отримані у двох паралельних вимірюваннях.
1 2
10.2. Результати вимірювань заносяться до облікової медичної документації, затвердженої наказом МОЗ України від 04.01.01 N 1:
- форма 237/о - "Аналіз крові (показники системи згортання)";
- форма 238/о - "Аналіз крові (показники системи згортання - скорочений варіант)";
- форма 250/о - "Журнал реєстрації аналізів і їх результатів";
- форма 262/о - "Журнал обліку аналізів, зроблених в лабораторії".
11. КОНТРОЛЬ ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
11.1. Визначення систематичної похибки вимірювань за даною методикою проводиться методом паралельних проб. Для цього проводять по два паралельних вимірювання 10 проб пацієнтів поточного дня.
11.2. Вимірювання розчинних фібрин-монмерних комплексів проводять відповідно до розділу 9.
11.3. Отримані дані заносять у таблицю 2.
Таблиця 2
------------------------------------------------------------------
| N | Х | Х | Х - Х |( Х - Х ) в степені 2|
| | 1 | 2 | 1 2 | 1 2 |
|---+---------+---------+----------------+-----------------------|
------------------------------------------------------------------
11.4. За отриманими результатами вимірювань розраховується середнє значення показників (п. 10.1), середньоквадратичне відхилення (дельта) та коефіцієнт варіації (V). Результати розрахунків порівнюються з величинами, наведеними в таблиці 1 розділу 2.
11.5. Будують контрольну карту кумулятивних сум.
11.6. Кожного дня різницю між двома паралельними вимірюваннями проб, відмічають на карті. Результати, які попадають за межі контрольних вимірювань (2дельта) вказують на наявність недоліків в системі вимірювання.
11.7. Якщо отримані результати вимірів не задовольняють вимоги розділу 2 та п. 11.6, то виміри необхідно повторити.
11.8. Якщо результати повторного контролю незадовільні, то виконання вимірювань необхідно припинити, виявити та усунути причини, які до цього призвели.
12. ПОСИЛАННЯ НА НОРМАТИВНІ ДОКУМЕНТИ
------------------------------------------------------------------
| Документ | Найменування | N пункту |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 24104-88Е |Весы лабораторные общего | 8.2.1; |
| |назначения и образцовые. | 8.2.2; |
| |Общие технические условия | 8.2.3; |
| | | 8.2.4; |
| | | 8.2.5 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 28311-89 |Дозаторы медицинские | 8.2.6; |
| |лабораторные | 8.3; 8.4;|
| | | 9.1; 9.2;|
| | | 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 25-1819.0021-90 |Секундомір механічний "Слава" | 9.1; 9.2;|
| |ДСПР 1-2-000. Технічні умови | 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 5.375-4215-77 |Центрифуга ЦЛР-1 | 8.3; 8.4 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 25-2022 0003-89 |Термометр | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 1770-74 |Посуда мерная лабораторная | 8.2.1; |
| |стеклянная. Цилиндры, | 8.2.2; |
| |мензурки, колбы, пробирки. | 8.2.3; |
| | | 8.2.4; |
| | | 8.2.5; |
| | | 8.3; 9.1;|
| | | 9.2; 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 3-3.741-83 |Лупа стеклянная круглая | 9.3 |
| |ЛПК-471 | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 208 УССР 273-84 |Пробірки поліетиленові | 8.2.6; |
| | | 8.3; 8.4 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 64-2-407-89 |Банки и флаконы с притертой | 8.2.1; |
| |пробкой | 8.2.2; |
| | | 8.2.3; |
| | | 8.2.4; |
| | | 8.2.5 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 6-09-4039-75 |6-аміногексанова кислота | 8.2.1 |
| |(є-амінокапронова кислота) | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 11078-78 |Натрію гідроксид | 8.2.1; |
| | | 8.2.2 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 4298-75 |Калій фосфорнокислий | 8.2.1; |
| |однозаміщений | 8.2.2 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 6709-79 |Вода дистильована | 8.2.1; |
| | | 8.2.2; |
| | | 8.2.4; |
| | | 8.2.5 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 22280-76 |Натрій лимоннокислий 5,5 | 8.2.4 |
| |водний | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 4233-77 |Натрій хлористий | 8.2.1 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Мінхімпромом СРСР |"Правила техніки безпеки при | 5 |
|від 27.07.77: |експлуатації електроустановок"| |
|НАОП 1.1.10-1.01-85 | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про подальше удосконалення | 5 |
|від 19.12.97 N 359 |атестації лікарів" | |
|( z0014-98 ) та від | | |
|23.10.91 N 146 | | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України від |"Про атестацію середніх | 5 |
|23.10.91 N 146 |медичних працівників" | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про затвердження медичної | 10.2 |
|від 04.01.01 N 1 |облікової документації, що | |
|( v0001282-01 ) |використовується в | |
| |лабораторіях | |
| |лікувально-профілактичних | |
| |закладів" | |
------------------------------------------------------------------
Міністерство охорони здоров'я України
ЗАТВЕРДЖЕНО
Наказ МОЗ України
15.11.2002 N 417
МЕТОДИКА ВИЗНАЧЕННЯ
В ПЛАЗМІ КРОВІ ЛЮДИНИ РОЗЧИННИХ ФІБРИН-МОНОМЕРНИХ КОМПЛЕКСІВ (ЕТАНОЛОВИЙ ТЕСТ) МВВ 42.01-15-2002
ПОГОДЖЕНО
Головний метролог
МОЗ України
А.М.Ніколенко
10.10.2002
ПОГОДЖЕНО
Головний спеціаліст з
клінічної лабораторної
діагностики МОЗ України
В.А.Дєєв
10.10.2002
1. ГАЛУЗЬ ЗАСТОСУВАННЯ
Цей документ встановлює порядок виявлення в плазмі крові розчинних фібрин-мономерних комплексів в присутності 50% етилового спирту.
Методика призначена для використання у закладах охорони здоров'я.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
Методика забезпечує вимірювання в плазмі крові розчинних фібрин-мономерних комплексів в присутності етилового спирту.
Тест рахують позитивним, коли в пробірці з'являється великий згусток або гель (хлоп'я або муть в плазмі крові не враховуються).
3. ЗАСОБИ ВИМІРЮВАЛЬНОЇ ТЕХНІКИ, ДОПОМІЖНЕ ОБЛАДНАННЯ, РЕАКТИВИ ТА МАТЕРІАЛИ
3.1. Ваги 2 кл. точності ГОСТ 24104-88Е
3.2. Важки лабораторні 2 кл. точності ГОСТ 7328-82Е
3.3. Дозатори лабораторні ГОСТ 28311-89
3.4. Секундомір механічний ТУ 25-1819.0021-90
3.5. Термометр скляний ртутний для точних вимірювань ГОСТ
13646-68
3.6. Центрифуга ЦЛР-1 ТУ 5-375-4215-77
3.7. Спиртомір ГОСТ 18481-81
3.8. Лупа складна кругла ЛПК-471 ТУ 3-3.741-83
3.9. Колби мірні місткістю від 100,0 мл до 1000,0 мл ГОСТ
1770-74
3.10. Пробірки поліетиленові місткістю (10-15) мл ТУ 208 УССР
273-84
3.11. Пробірки скляні мірні місткістю 10 мл ГОСТ 1770-74
3.12. Флакони з притертим корком ТУ 64-2-407-89
3.13. Циліндри місткістю (25-50) мл ГОСТ 1770-74
3.14. 6-аміногексанова кислота (є-амінокапронова кислота) ТУ
6-09-4039-75
3.15. Вода дистильована ГОСТ 6709-79
3.16. Натрій лимоннокислий 5,5 водний ГОСТ 22280-76
3.17. Спирт етиловий ректифікований ГОСТ 5962-67
Всі засоби вимірювальної техніки повинні бути повірені у встановленому порядку. Допускається застосування іншого обладнання, лабораторного посуду, а також реактивів і матеріалів з метрологічними та технічними характеристиками не нижчими, ніж наведені.
4. МЕТОД ВИМІРЮВАННЯ
Принцип методу полягає в руйнуванні розчинних комплексів фібрин-мономеру з фібриногеном та фрагментами фібрину в плазмі крові при додаванні 50% спирту етилового та подальше утворення полімерних волокон фібрину, що свідчить про активацію системи зсідання.
5. ВИМОГИ ТЕХНІКИ БЕЗПЕКИ
При виконанні вимірювань необхідно дотримуватись вимог НАОП 1.3.10-1.06-77 "Загальні правила безпеки роботи в хімічних лабораторіях", затверджених 27.07.77 Мінхімпромом СРСР: НАОП 1.1.10-1.01-85 "Правила техніки безпеки при експлуатації електроустановок", затверджено 10.09.85 Міненерго СРСР та ЦК галузевої профспілки; правил безпеки роботи, що представлені в експлуатаційній документації на засоби вимірювальної техніки та допоміжні пристрої.
6. ВИМОГИ ДО КВАЛІФІКАЦІЇ ВИКОНАВЦЯ
До виконання методики допускаються спеціалісти із спеціальною освітою, які відповідають кваліфікаційним вимогам відповідно до наказів МОЗ України від 19.12.97 N 359, від 23.10.91 N 146, та пройшли курси з клінічної лабораторної діагностики у державних навчальних закладах освіти системи МОЗ України різного рівня акредитації, наукових закладах або таких, що до них прирівняні, і мають право видавати документи державного зразка згідно з чинним законодавством України.
7. УМОВИ ВИКОНАННЯ ВИМІРЮВАНЬ
При проведені вимірювань повинні бути забезпечені наступні умови:
7.1. Температура середовища (22+-5) град. С.
7.2. Відносна вологість від 60% до 75%.
7.3. Атмосферний тиск від 84,0 до 106,7 кПа (від 600,0 до 800,3 мм рт.ст).
7.4. Напруга електромережі (220+-22) В.
7.5. Освітленість від 300 до 400 лк.
8. ПІДГОТОВКА ДО ВИЗНАЧЕННЯ
8.1. Усі прилади та допоміжні пристрої привести у робочий стан згідно з інструкцією по експлуатації.
8.2. Приготування розчинів
8.2.1. Приготування розчину лимоннокислого натрію (3,8 г на 100г розчину).
Наважку (3,80+-0,01) г натрію лимоннокислого (п. 3.16) розчиняють у 96,2 мл дистильованої води (п. 3.15), яку відміряють циліндром (п. 3.13). Розчин зберігають при температурі від 4 до 6 град. С протягом одного тижня.
8.2.2. Приготування розчину 6-аміногексанової кислоти (є-амінокапронова кислота).
Наважку (325,0+-0,1) мг 6-аміногексанової кислоти (п. 3.14) розчиняють у 25 мл розчину натрію лимоннокислого (п. 8.2.1), який відміряють циліндром (п. 3.13). Суміш готують перед виконанням досліджень.
8.2.3. Приготування 50% розчину етилового спирту.
Спирт етиловий (п. 3.17) розбавляють рівним об'ємом дистильованої води (п. 3.15), точність концентрації перевіряється спиртоміром (п. 3.7).
8.3. Одержання плазми крові.
Кров у хворого беруть натщесерце з вени гострою сухою голкою з широким діаметром, без шприца (для запобігання гемолізу). При заборі крові перші 5-6 крапель відкидають. Під час взяття крові не рекомендується накладати джгут і робити масаж передпліччя для запобігання активації зсідання крові і фібринолізу.
У пробірку поліетиленову (п. 3.10) дозатором лабораторним (п. 3.3) вносять 0,5 мл розчину натрію лимоннокислого (п. 8.2.1) та змішують з 4,5 мл крові (співвідношення 1:9). Пробірку з сумішшю щільно закривають корком і повільними рухами обережно декілька разів перемішують (не струшуючи).
Центрифугують (п. 3.6) протягом 10 хв з прискоренням 1200-1400 g. Плазму крові переносять дозатором лабораторним (п. 3.3) у пробірку поліетиленову (п. 3.10).
Вимоги до зразків плазми крові установлюються у розділах преаналітики посібників з клінічної лабораторної діагностики.
9. ХІД ВИЗНАЧЕННЯ
9.1. 0,4 мл плазми крові, що досліджується (п. 8.3), дозатором лабораторним (п. 3.3) переносять в пробірку мірну лабораторну (п. 3.11) і додають 0,15 мл розчину 50% етилового спирту (п. 8.2.3). Пробірку струшують, вмикають секундомір (п.3.4) і залишають пробірку при температурі (20+-2) град. С.
9.2. Через 10 хв результати оцінюють візуально за допомогою збільшувального скла (п. 3.8). Тест рахують позитивним, коли в пробірці з'являється великий згусток або гель (хлоп'я або муть в плазмі крові не враховуються).
Спостереження проводять протягом 10 хвилин. Більш пізнє утворення гелю не враховується.
10. ОБРОБКА ТА ОФОРМЛЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ВИМІРЮВАНЬ
10.1. За результат вимірювання приймають середнє значення
(х ,) двох паралельних вимірювань, яке розраховується за
ср
формулою: х = (х + х )/2,
ср 1 2
де х , х - значення, отримані у двох паралельних вимірюваннях.
1 2
10.2. Результати вимірювань заносяться до облікової медичної документації, затвердженої наказом МОЗ України від 04.01.01 N 1:
- форма 237/о - "Аналіз крові (показники системи згортання)";
- форма 238/о - "Аналіз крові (показники системи згортання - скорочений варіант)";
- форма 250/о - "Журнал реєстрації аналізів і їх результатів";
- форма 262/о - "Журнал обліку аналізів, зроблених в лабораторії".
обліку аналізів, зроблених в лабораторії".
11. КОНТРОЛЬ ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
11.1. Визначення систематичної похибки вимірювань за даною методикою проводиться методом паралельних проб. Для цього проводять по два паралельних вимірювання 10 проб пацієнтів поточного дня.
11.2. Вимірювання розчинних фібрин-мономерних комплексів проводять відповідно до розділу 9.
11.3. Отримані дані заносять у таблицю 3.
Таблиця 3
------------------------------------------------------------------
| N | Х | Х | Х - Х |( Х - Х ) в степені 2|
| | 1 | 2 | 1 2 | 1 2 |
|---+---------+---------+----------------+-----------------------|
------------------------------------------------------------------
11.4. За отриманими результатами вимірювань розраховується середнє значення показників (п. 10.1), середньоквадратичне відхилення (дельта) та коефіцієнт варіації (V). Результати розрахунків порівнюються з величинами, наведеними в таблиці 1 розділу 2.
11.5. Будують контрольну карту кумулятивних сум.
11.6. Кожного дня різницю між двома паралельними вимірюваннями проб, відмічають на карті. Результати, які попадають за межі контрольних вимірювань (2дельта) вказують на наявність недоліків в системі вимірювання.
11.7. Якщо отримані результати вимірів не задовольняють вимоги розділу 2 та п. 11.6, то виміри необхідно повторити.
11.8. Якщо результати повторного контролю незадовільні, то виконання вимірювань необхідно припинити, виявити та усунути причини, які до цього призвели.
12. ПОСИЛАННЯ НА НОРМАТИВНІ ДОКУМЕНТИ
------------------------------------------------------------------
| Документ | Найменування | N пункту |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 7328-82Е |Меры массы общего назначения | 8.2.1; |
| |и образцовые. Технические | 8.2.2 |
| |условия | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 24104-88Е |Весы лабораторные общего | 8.2.1; |
| |назначения и образцовые. | 8.2.2 |
| |Общие технические условия | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 28311-89 |Дозаторы медицинские | 8.3; |
| |лабораторные | 9.1; 9.2 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 25-1819.0021-90 |Секундомір механічний "Слава" | 9.1; 9.2 |
| |ДСПР 1-2-000. Технічні умови | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 5-375-4215-77 |Центрифуга ЦЛР-1 | 8.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ ТУ 3-3.741-83 |Лупа складна кругла ЛПК-471 | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 18481-81 |Спиртометр - ареометр и | 9.1 |
| |цилиндры стеклянные. | |
| |Технические условия | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 13646-68 |Термометр скляний ртутний для | 8.2.1; |
| |точних вимірювань | 8.2.2; |
| | | 8.2.3; |
| | | 9.1; 9.2 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 1770-74 |Посуда мерная лабораторная | 8.3 |
| |стеклянная. Цилиндры, | |
| |мензурки, колбы, пробирки. | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 208 УССР 273-84 |Пробірки поліетиленові | 8.2.1; |
| | | 8.2.2; |
| | | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 64-2-407-89 |Банки и флаконы с притертой | 8.2.1; |
| |пробкой | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 6709-79 |Вода дистилированная. | 8.2.2 |
| |Технические условия | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 6-09-4039-75 |6-аміногексанова кислота | 8.2.1 |
| |(є-амінокапронова кислота) | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 22280-76 |Натрій лимоннокислий 5,5 | 8.2.4 |
| |водний | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 18300-87 |Спирт етиловий | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Мінхімпромом СРСР |"Правила техніки безпеки при | 5 |
|від 27.07.77: |експлуатації електроустановок"| |
|НАОП 1.1.10-1.01-85 | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про подальше удосконалення | 5 |
|від 19.12.97 N 359 |атестації лікарів" | |
|( z0014-98 ) та від | | |
|23.10.91 N 146 | | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України від |"Про атестацію середніх | 5 |
|23.10.91 N 146 |медичних працівників" | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про затвердження медичної | 10.2 |
|від 04.01.01 N 1 |облікової документації, що | |
|( v0001282-01 ) |використовується в | |
| |лабораторіях | |
| |лікувально-профілактичних | |
| |закладів" | |
------------------------------------------------------------------
Міністерство охорони здоров'я України
ЗАТВЕРДЖЕНО
Наказ МОЗ України
15.11.2002 N 417
МЕТОДИКА ВИЗНАЧЕННЯ
В ПЛАЗМІ КРОВІ РОЗЧИННИХ ФІБРИН-МОНОМЕРНИХ КОМПЛЕКСІВ (ПРОТАМІНСУЛЬФАТНИЙ ТЕСТ) МВВ 42.01-16-2002
ПОГОДЖЕНО
Головний метролог
МОЗ України
А.М.Ніколенко
10.10.2002
ПОГОДЖЕНО
Головний спеціаліст з
клінічної лабораторної
діагностики МОЗ України
В.А.Дєєв
10.10.2002
1. ГАЛУЗЬ ЗАСТОСУВАННЯ
Цей документ встановлює порядок виявлення в плазмі крові розчинних фібрин-мономерних комплексів в присутності протамінсульфату.
Методика призначена для використання у закладах охорони здоров'я.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
Методика забезпечує виявлення в плазмі крові розчинних фібрін-мономерних комплексів в присутності протамінсульфату по появі желеподібного згустку.
3. ЗАСОБИ ВИМІРЮВАЛЬНОЇ ТЕХНІКИ, ДОПОМІЖНЕ ОБЛАДНАННЯ, РЕАКТИВИ ТА МАТЕРІАЛИ
3.1. Ваги 2 кл. точності ГОСТ 24104-88Е
3.2. Важки лабораторні 2 кл. точності ГОСТ 7328-82Е
3.3. Дозатори лабораторнік ГОСТ 28311-89
3.4. Секундомір механічний ТУ 25-1819.0021-90
3.5. Термометр скляний ртутний для точних вимірювань ГОСТ
13646-68
3.5. Центрифуга ЦЛР-1 ТУ 5-375-4215-77
3.6. Колби мірні місткістю від 100,0 мл до 1000,0 мл ГОСТ
1770-74
3.7. Пробірки поліетиленові місткістю (10-15) мл ТУ 208 УССР
273-84
3.8. Пробірки скляні мірні місткістю 10 мл ГОСТ 1770-74
3.9. Циліндри місткістю (25-50) мл ГОСТ 1770-74
3.10. 6-аміногексанова кислота (є-амінокапронова кислота) ТУ
6-09-4039-75
3.11. Вода дистильована ГОСТ 6709-79
3.12. Натрій лимоннокислий ГОСТ 22280-76
3.13. Протамінсульфат (Sigma, США)
Всі засоби вимірювальної техніки повинні бути повірені у встановленому порядку. Допускається застосування іншого обладнання, лабораторного посуду, а також реактивів і матеріалів з метрологічними та технічними характеристиками не нижчими, ніж наведені.
4. МЕТОД ВИМІРЮВАННЯ
Принцип методу полягає в руйнуванні розчинних комплексів фібрин-мономеру з фібриногеном та фрагментами фібрину в плазмі крові при додаванні до неї розчинів протамінсульфату та подальше утворення полімерних волокон фібрину, що свідчить про активацію системи зсідання.
5. ВИМОГИ ТЕХНІКИ БЕЗПЕКИ
При виконанні вимірювань необхідно дотримуватись вимог НАОП 1.3.10-1.06-77 "Загальні правила безпеки роботи в хімічних лабораторіях", затверджених 27.07.77 Мінхімпромом СРСР: НАОП 1.1.10-1.01-85 "Правила техніки безпеки при експлуатації електроустановок", затверджено 10.09.85 Міненерго СРСР та ЦК галузевої профспілки; правил безпеки роботи, що представлені в експлуатаційній документації на засоби вимірювальної техніки та допоміжні пристрої.
6. ВИМОГИ ДО КВАЛІФІКАЦІЇ ВИКОНАВЦЯ
До виконання методики допускаються спеціалісти із спеціальною освітою, які відповідають кваліфікаційним вимогам відповідно до наказів МОЗ України від 19.12.97 N 359, від 23.10.91 N 146, та пройшли курси з клінічної лабораторної діагностики у державних навчальних закладах освіти системи МОЗ України різного рівня акредитації, наукових закладах або таких, що до них прирівняні, і мають право видавати документи державного зразка згідно з чинним законодавством України.
7. УМОВИ ВИКОНАННЯ ВИМІРЮВАНЬ
При проведені вимірювань повинні бути забезпечені наступні умови:
7.1. Температура середовища (22+-5) град. С.
7.2. Відносна вологість від 60% до 75%.
7.3. Атмосферний тиск від 84,0 до 106,7 кПа (від 600,0 до 800,3 мм рт.ст).
7.4. Напруга електромережі (220+-22) В.
7.5. Освітленість від 300 до 400 лк.
8. ПІДГОТОВКА ДО ВИЗНАЧЕННЯ
8.1. Усі прилади та допоміжні пристрої привести у робочий стан згідно з інструкцією по експлуатації.
8.2. Приготування розчинів
8.2.1. Приготування розчину лимоннокислого натрію (3,8 г на 100 г розчину).
Наважку (3,80+-0,01) г натрію лимоннокислого (п. 3.12) розчиняють у 96,2 мл дистильованої води (п. 3.11), яку відміряють циліндром (п. 3.9). Розчин зберігають при температурі від 4 до 6 град. С протягом одного тижня.
8.2.2. Приготування розчину 6-аміногексанової кислоти (є-амінокапронова кислота).
Наважку (325,0+-0,1) мг 6-аміногексанової кислоти (п. 3.10) розчиняють у 25 мл розчину натрію лимоннокислого (п. 8.2.1), який відміряють циліндром (п. 3.9). Суміш готують перед виконанням досліджень.
8.2.3. Наважку (1,00+-0,01) г протамінсульфату (п. 3.13) переносять у мірну колбу місткістю 100,0 мл (п.3.6) і розчиняють в дистильованій воді (п. 3.11). Об'єм розчину доводять до мітки. Розчин готують перед виконанням досліджень.
8.3. Одержання плазми крові.
Кров у хворого беруть натщесерце з вени гострою сухою голкою з широким діаметром, без шприца (для запобігання гемолізу). При заборі крові перші 5-6 крапель відкидають. Під час взяття крові не рекомендується накладати джгут і робити масаж передпліччя для запобігання активації зсідання крові і фібринолізу.
У пробірку поліетиленову (п. 3.7) дозатором лабораторним (п. 3.3) вносять 0,5 мл розчину натрію лимоннокислого (п. 8.2.1) та змішують з 4,5 мл крові (співвідношення 1:9). Пробірку з сумішшю щільно закривають корком і повільними рухами обережно декілька разів перемішують (не струшуючи).
Центрифугують (п. 3.5) протягом 10 хв з прискоренням 1200-1400 g. Плазму крові переносять дозатором лабораторним (п. 3.3) у пробірку поліетиленову (п. 3.7).
Вимоги до зразків плазми крові установлюються у розділах преаналітики посібників з клінічної лабораторної діагностики.
8.4. Одержання стандартної донорської плазми крові.
Для приготування стандартної донорської плазми крові необхідно змішати у рівних співвідношеннях плазму крові більш ніж 7 донорів, отриману, як вказано в п. 8.3, розфасувати по 1-2 мл у пробірки поліетиленові (п. 3.7), заморозити та зберігати протягом двох тижнів при температурі мінус 20 град. С.
9. ХІД ВИЗНАЧЕННЯ
9.1. 0,4 мл плазми крові, що досліджується (п. 8.3), дозатором лабораторним (п. 3.3) переносять в пробірку мірну лабораторну (п. 3.8) і додають 0,15 мл розчину протамінсульфату (п. 8.2.3). Пробірку струшують, вмикають секундомір (п.3.4) і залишають пробірку при температурі (20+-2) град. С.
9.2. Через 10 хвилин визначають появу желеподібного згустку. Спостереження проводять протягом 10 хвилин. Більш пізнє утворення гелю не враховується. Тест рахують позитивним, коли в пробірці з'являється великий згусток або гель (хлоп'я або муть в плазмі крові не враховуються).
10. ОБРОБКА ТА ОФОРМЛЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ВИМІРЮВАНЬ
10.1. За результат вимірювання приймають середнє значення
(х , ) двох паралельних вимірювань, яке розраховується за
ср
формулою: х = (х + х )/2,
ср 1 2
де х , х - значення, отримані у двох паралельних вимірюваннях.
1 2
10.2. Результати вимірювань заносяться до облікової медичної документації, затвердженої наказом МОЗ України від 04.01.01 N 1:
- форма 237/о - "Аналіз крові (показники системи згортання)";
- форма 238/о - "Аналіз крові (показники системи згортання - скорочений варіант)";
- форма 250/о - "Журнал реєстрації аналізів і їх результатів";
- форма 262/о - "Журнал обліку аналізів, зроблених в лабораторії".
11. КОНТРОЛЬ ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
11.1. Визначення систематичної похибки вимірювань за даною методикою проводиться методом паралельних проб. Для цього проводять по два паралельних вимірювання 10 проб пацієнтів поточного дня.
11.2. Вимірювання розчинних фібрин-мономерних комплексів проводять відповідно до розділу 9.
11.3. Отримані дані заносять у таблицю 2.
Таблиця 2
------------------------------------------------------------------
| N | Х | Х | Х - Х |( Х - Х ) в степені 2|
| | 1 | 2 | 1 2 | 1 2 |
|---+---------+---------+----------------+-----------------------|
------------------------------------------------------------------
11.4 За отриманими результатами вимірювань розраховується середнє значення показників (п. 10.1), середньоквадратичне відхилення (дельта) та коефіцієнт варіації (V). Результати розрахунків порівнюються з величинами, наведеними в таблиці 1 розділу 2.
11.5. Будують контрольну карту кумулятивних сум.
11.6. Кожного дня різницю між двома паралельними вимірюваннями проб, відмічають на карті. Результати, які попадають за межі контрольних вимірювань (2дельта) вказують на наявність недоліків в системі вимірювання.
11.7. Якщо отримані результати вимірів не задовольняють вимоги розділу 2 та п. 11.6, то виміри необхідно повторити.
11.8. Якщо результати повторного контролю незадовільні, то виконання вимірювань необхідно припинити, виявити та усунути причини, які до цього призвели.
12. ПОСИЛАННЯ НА НОРМАТИВНІ ДОКУМЕНТИ
------------------------------------------------------------------
| Документ | Найменування | N пункту |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 24104-88Е |Весы лабораторные общего | 8.2.1; |
| |назначения и образцовые. | 8.2.2; |
| |Общие технические условия | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 28311-89 |Дозаторы медицинские | 8.3; 8.4;|
| |лабораторные | 9.1; 9.2 |
| | | 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 25-1819.0021-90 |Секундомір механічний | 9.1; 9.2;|
| | | 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 5-375-4215-77 |Центрифуга ЦЛР-1 | 8.3; 8.4 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 13646-68 |Термометр скляний ртутний для | 9.1 |
| |точних вимірювань | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 1770-74 |Посуда мерная лабораторная | 8.2.1; |
| |стеклянная. Цилиндры, | 8.2.2; |
| |мензурки, колбы, пробирки. | 8.2.3; |
| | | 9.1; 9.2;|
| | | 9.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 208 УССР 273-84 |Пробірки поліетиленові | 8.3; |
| | | 8.4 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ТУ 64-2-407-89 |Банки и флаконы с притертой | 8.2.1; |
| |пробкой | 8.2.2; |
| | | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 6709-79 |Вода дистильована | 8.2.1; |
| | | 8.2.2; |
| | | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|ГОСТ 22280-76 |Натрій лимоннокислий 5,5 | 8.2.1 |
| |водний | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|(Sigma), США |Протамінсульфат | 8.2.3 |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Мінхімпромом СРСР |"Правила техніки безпеки при | 5 |
|від 27.07.77: |експлуатації електроустановок"| |
|НАОП 1.1.10-1.01-85 | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про подальше удосконалення | 5 |
|від 19.12.97 N 359 |атестації лікарів" | |
|( z0014-98 ) та від | | |
|23.10.91 N 146 | | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України від |"Про атестацію середніх | 5 |
|23.10.91 N 146 |медичних працівників" | |
|( v0146282-91 ) | | |
|----------------------+------------------------------+----------|
|Наказ МОЗ України |"Про затвердження медичної | 10.2 |
|від 04.01.01 N 1 |облікової документації, що | |
|( v0001282-01 ) |використовується в | |
| |лабораторіях | |
| |лікувально-профілактичних | |
| |закладів" | |
------------------------------------------------------------------
Міністерство охорони здоров'я України
ЗАТВЕРДЖЕНО
Наказ МОЗ України
15.11.2002 N 417
МЕТОДИКА ВИЗНАЧЕННЯ В ПЛАЗМІ КРОВІ ЛЮДИНИ
РОЗЧИННИХ ФІРИБРИН-МОНОМЕРНИХ КОМПЛЕКСІВ (БЕТА)-НАФТОЛОВИЙ ТЕСТ) МВВ 42.01-17-2002
ПОГОДЖЕНО
Головний метролог
МОЗ України
А.М.Ніколенко
10.10.2002
ПОГОДЖЕНО
Головний спеціаліст з
клінічної лабораторної
діагностики МОЗ України
В.А.Дєєв
10.10.2002
1. ГАЛУЗЬ ЗАСТОСУВАННЯ
Цей документ встановлює порядок вимірювання в плазмі крові розчинних фібрин-мономерних комплексів в присутності (бета)-нафтолу.
Методика призначена для використання у закладах охорони здоров'я.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА ПОХИБКИ ВИМІРЮВАНЬ
Методика забезпечує виявлення в плазмі крові розчинних фібрин-мономерних комплексів в присутності (бета)-нафтолу. Якщо в пробірці немає часток - реакція негативна, невеликі гранули - реакція 1+, невеликі пластівці - 2+, поява ниток фібрину чи невеликого згустку - 3+, утворення великого згустку - 4+.
3. ЗАСОБИ ВИМІРЮВАЛЬНОЇ ТЕХНІКИ, ДОПОМІЖНЕ ОБЛАДНАННЯ, РЕАКТИВИ ТА МАТЕРІАЛИ
3.1. Ваги 2 кл. точності ГОСТ 24104-88Е
3.2. Важки лабораторні 2 кл. точності ГОСТ 7328-82Е
3.3. Дозатори лабораторні ГОСТ 28311-89
3.4. Секундомір механічний ТУ 25-1819. 0021-90
3.5. Термометр скляний ртутний для точних вимірювань
ГОСТ 13646-68
3.6. Центрифуга ЦЛР-1 ТУ 5-375-4215-77
3.7. Спиртомір ГОСТ 18481-81
3.8. Збільшувальне скло (лупа) ЛПК-471 ТУ 3-3.741-83
3.9. Колби мірні місткістю від 100,0 мл до 1000,0 мл ГОСТ
1770-74
3.10. Пробірки поліетиленові місткістю (10-15) мл ТУ 208 УССР
273-84
3.11. Пробірки скляні мірні місткістю 10 мл ГОСТ 1770-74
3.12. Флакони з притертим корком ТУ 64-2-407-89
3.13. Циліндри місткістю (25-50) мл ГОСТ 1770-74
3.14. 6-аміногексанова кислота (є-амінокапронова кислота) ТУ
6-09-4039-75
3.15. Вода дистильована ГОСТ 6709-79
3.16. Натрій лимоннокислий 5,5 водний ГОСТ 22280-76
3.17. (бета)-нафтол ТУ 609518
3.18. Спирт етиловий ректифікований ГОСТ 5962-67
Всі засоби вимірювальної техніки повинні бути повірені у встановленому порядку. Допускається застосування іншого обладнання, лабораторного посуду, а також реактивів і матеріалів з метрологічними та технічними характеристиками не нижчими, ніж наведені.
4. МЕТОД ВИМІРЮВАННЯ
Принцип методу полягає в руйнуванні розчинних комплексів фібрин-мономеру з фібриногеном та фрагментами фібрину в плазмі крові при додаванні (бета)-нафтолу та подальше утворення полімерних волокон фібрину, що свідчить про активацію системи зсідання.
5. ВИМОГИ ТЕХНІКИ БЕЗПЕКИ
При виконанні вимірювань необхідно дотримуватись вимог НАОП 1.3.10-1.06-77 "Загальні правила безпеки роботи в хімічних лабораторіях", затверджених 27.07.77 Мінхімпромом СРСР: НАОП 1.1.10-1.01-85 "Правила техніки безпеки при експлуатації електроустановок", затверджено 10.09.85 Міненерго СРСР та ЦК галузевої профспілки; правил безпеки роботи, що представлені в експлуатаційній документації на засоби вимірювальної техніки та допоміжні пристрої.
6. ВИМОГИ ДО КВАЛІФІКАЦІЇ ВИКОНАВЦЯ
До виконання методики допускаються спеціалісти із спеціальною освітою, які відповідають кваліфікаційним вимогам відповідно до наказів МОЗ України від 19.12.97 N 359, від 23.10.91 N 146, та пройшли курси з клінічної лабораторної діагностики у державних навчальних закладах освіти системи МОЗ України різного рівня акредитації, наукових закладах або таких, що до них прирівняні, і мають право видавати документи державного зразка згідно з чинним законодавством України.