МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ
УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного
Государственного санитарного
врача СССР
В.Е.Ковшило
20.10.1976 N 1515-76
Методические рекомендации по определению оловоорганических стабилизаторов в биосредах
Кратная характеристика соединений
Оловоорганические стабилизаторы широко применяют в производстве пластмасс для получения прозрачных полимеров, обладающих повышенной устойчивостью к деструкции.
Диизооктилоловокарбоксилат, диоктилолово, диизооктилтиогликолят дибутилолова - труднорастворимы в воде, неприятно пахнущие маслянистые жидкости.
По литературным данным, в основном, все стабилизаторы на
основе олова обладают высокой токсичностью. Методов по определению
оловоорганических стабилизаторов в биосредах нет. В литературе
опубликован метод определения оловоорганических стабилизаторов в
водных вытяжках. Подвижная система, которая используется в этом
методе не подходит для определения оловоорганических
стабилизаторов в биосредах, так как при этой системе пятна
находятся на старте, разгон очень длительный около 1-2 суток,
примеси, имеющиеся в препаратах из-за низкого R мешают
f
определению оловоорганических стабилизаторов. Коэкстрактивные
вещества биосред не мешают определению оловоорганических
стабилизаторов.
Принцип метода
Метод основан на экстракции препарата из биологического материала хлороформом и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля. Проявление основано на реакции комплексного соединения олова с дитизоном, окрашенного в красный цвет. Для получения более четких пятен, которые не изменяют свою окраску в течение 5-6 часов, использовали проявляющий раствор N 1 (насыщенный раствор ализарина в этаноле). Так же в качестве проявляющего раствора использовали раствор N 2 (0,05% р-р дитизона в хлороформе).
Чувствительность метода для мочи - 5 мкг в пробе, для органов - 10 мкг в пробе. Процент определения 80-85%.
Реактивы и растворы
1. Хлороформ, "хч", ГОСТ 3160-51.
2. Силикагель марки КСК, ГОСТ 3956-54, размолотый и просеянный через сито 100 меш.
3. Гипс медицинский.
4. Стандартные растворы стабилизаторов в хлороформе с содержанием препарата 100 мкг/мл.
5. Натрий сернокислый безводный, "хч", ГОСТ 4166-48, прокаленный.
6. Проявляющий раствор N 1 (насыщенный ализарин в этаноле).
7. Проявляющий раствор N 2 (0,05% раствор дитизона в хлороформе), свежеприготовленный.
8. Уксусная кислота, "хч", ГОСТ 61-69.
9. Аммиак, 25%.
Приборы и посуда
1. Пластинки для хроматографии. Стеклянные пластинки (9x12) тщательно промывают водой, содовым раствором, хромовой смесью, дистиллированной водой.
2. Делительные воронки на 250 мл, ГОСТ 8613-64.
3. Прибор для отгонки растворителя.
4. Воронки стеклянные диаметром 75 мм, ГОСТ 8613-64.
5. Пипетки для нанесения проб (пипетки на 1 мл с ценой деления 0,1 мл и вместимостью 0,3-0,4 мл или шприц емкостью 1 мл).
6. Камера для хроматографирования с притертой стеклянной крышкой, ГОСТ 10565-63.
7. Пульверизаторы стеклянные.
8. Баня водяная.
9. Камера для опрыскивания пластинок (стеклянный колпак диаметром 200-250 см СТУ 30-6192).
10. Камера с аммиаком.
11. Колбы конические на 100 мл.
Приготовление пластин
14 г силикагеля, 1 г гипса и 50 мл дистиллированной воды тщательно растирают в ступке. Полученную массу равномерным слоем наносят на стеклянные пластинки и оставляют сохнуть на воздухе при комнатной температуре. Из указанного выше количества сорбционной массы может быть приготовлено 8-10 пластинок.
Определение оловоорганических стабилизаторов в моче и крови
Мочу или кровь 2-3 мл отбирают в делительную воронку на
100 мл (для предотвращения свертывания крови добавляют 0,03 мл
2% раствора лимоннокислого натрия), разбавляют дистиллированной
водой (50 мл) и трижды экстрагируют хлороформом (по 10 мл три
раза). Объединенные экстракты фильтруют через безводный
сернокислый натрий, после чего отгоняли растворитель на водяной
бане до объема 0,2-0,3 мл. Остаток количественно переносят на
хроматографическую пластинку с силикагелем, которую помещают в
сосуд с подвижной системой растворителей (смесь хлороформ-уксусная
кислота (10:1). После подъема подвижной фазы на высоту пластины
равную 10 см, пластинку извлекают из камеры и сушат до полного
удаления следов растворителей. После этого пластинку опрыскивают
проявляющим растворам N 1, ставят на две минуты в камеру с
аммиаком, а затем опрыскивают 0,05% раствором дитизона в
хлороформе. О наличии оловоорганических соединений свидетельствуют
четкие оранжево-красные пятна на белом фоне с R = 0,88+-0,05.
f
Определение оловоорганических стабилизаторов в органах
Навеску 3-5 г тщательно растирают в фарфоровой ступке, заливают 20 мл хлороформа, перемешивают в течении 2-х канут и экстракт сливают. Экстракцию проводят трижды (20, 20 и 10 мл).
Объединенные экстракты фильтруют через безводный сульфат натрия и проводят определение как описано выше.
Количественное содержание препарата в биологических средах рассчитывается следующим образом:
Для мочи и крови - a
A = - , где
y
а - количество стабилизатора, найденного в пробе;
у - объем пробы, взятой для анализа.
Для органов -
B x a
A = ----- , где
c
B - вес органа;
c - навеска органа, взятая для анализа;
а - количество стабилизатора, найденного в пробе.
Литература
1. Тезисы Второго Всесоюзного совещания по вопросам санитарно-гигиенического контроля за применением полимерных материалов в строительстве, для изготовления одежды и обуви и за применением химических средств в быту. Киев, 1976 г.